分選連接蛋白5抗體

1、制備抗原。

2、選擇實驗動物。

3、動物免疫。

4、試取血進(jìn)行測試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對異種動物而言，是良好的抗原物質(zhì)?？梢源碳ぎ惙N動物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當(dāng)提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標(biāo)記反應(yīng)中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實驗動物 兔

4．其它材料及試劑

Sorting nexin 1 (SNX1) is a member of a large family of hydrophilic proteins that interact with a variety of receptor types and are involved in intracellular trafficking (1). SNX1 and the related splice variant, SNX1A, bind the epidermal growth factor

信號素6D(SEMA6D)ELISA試劑盒

腺苷酸激酶2(AK2)ELISA試劑盒

細(xì)胞周期素O(CCNO)ELISA試劑盒

細(xì)胞附著蛋白2(CYTH2)ELISA試劑盒

圍脂滴蛋白4(PLIN4)ELISA試劑盒

外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶2(ENPP2)ELISA試劑盒

突觸融合蛋白19(STX19)ELISA試劑盒

停靠蛋白7(DOK7)ELISA試劑盒

羰基還原酶4(CBR4)ELISA試劑盒

速受體3(TACR3)ELISA試劑盒

絲蛋白酶肽酶抑制因子B支成員7(SERPINB7)ELISA試劑盒

輸出蛋白6(XPO6)ELISA試劑盒

生長受體4(SSTR4)ELISA試劑盒

神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白2(NRP2)ELISA試劑盒

三葉因子2(TFF2)ELISA試劑盒

熱休克蛋白β6(HSPβ6)ELISA試劑盒

親核素α3(KPNα3)ELISA試劑盒

前列腺凋亡應(yīng)答因子4(PAR4)ELISA試劑盒

皮卡丘素(Pikachurin)ELISA試劑盒

尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶5(NOX5)ELISA試劑盒

木酮糖酶同源物(XYLB)ELISA試劑盒

分選連接蛋白5抗體淡綠（LIGHT GREEN）復(fù)染試劑盒

10倍磷酸平衡鹽（PBS）緩沖溶液

10倍碳酸濃縮緩沖溶液

10倍TBS濃縮緩沖溶液

10倍PIPES濃縮緩沖溶液

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對靶蛋白的特異性。選擇針對不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因為由于樣品處理過程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對它們產(chǎn)生的抗體可能無法識別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對于單克隆抗體尤其如此。